Фрагментация днк спермограммы где сдать. Исследование на фрагментацию днк сперматозоидов

После проведения анализа сперматозоидов требуется определить процесс фрагментации ДНК. У многих мужчин возникает вопрос, что такое фрагментация сперматозоида.

Фрагментация ДНК сперматозоида – это процесс, в результате которого производится нарушение целостности цепочек нуклеиновых генетических клеток, расположенных в сперматозоиде. Если разрывы ДНК спирали увеличиваются, что целостность генетической информации нарушается. Это приводит к уменьшению вероятности возникновения беременности.

Способ определения микроповреждений ДНК

Лишь в единичных случаях яйцеклетка способна устранить некоторые дефекты ДНК спирали сперматозоида. Вероятность восстановления структуры генетического материала посредством яйцеклетки зависит от следующих факторов:

• Какой именно характер разрушения ДНК цепи.
• Какой процент генетического материала находится в поврежденном состоянии.
• Насколько качественна яйцеклетка, ведь именно от этого зависит возможность убрать дефекты характерные для ДНК спирали сперматозоида. В этом случае особое внимание следует уделить возрасту пациентки.

Отметим, что существует вероятность того, что результаты от одного донора будут отличаться в зависимости от времени сдачи. Величина фрагментации ДНК, как правило, изменяется в течение недели или месяца.

Терапия по восстановлению фрагментации ДНК

Ученые доказали, что для минимизации фрагментации ДНК следует использовать антиоксиданты. При этом следует учесть тот факт, что такие терапевтические мероприятия не дают результат в том случае, если фрагментация стала следствием длительного воздействия на организм токсичных веществ или высокой температуры. Под воздействием этих факторов производится нарушение ферментов каспазы и белков эндонуклеазы сперматозоида.

Врачи рекомендуют в таком случае извлекать сперматозоиды прямо из яичек, тогда удается получить материал, в котором процесс фрагментации протекает медленнее. Таким образом, получается материал более высокого качества.

Спермограмма и тест на целостность структуры ДНК

Отметим, что спермограмма определяет совсем другие характеристики сперматозоидов не обращая внимание на цепочку ДНК. Спермограмма делает основной упор на исследование физических характеристик семенной жидкости, ее насыщенности, подвижности сперматозоидов и их строение. В результате такой процедуры не производится диагностирование генетической структуры.

Определение причин разрушения ДНК сперматозоидов

На формирование целостной структуры ДНК сперматозоидов влияют внутренние и внешние факторы. Внутренние заключаются в следующем:

Внешние факторы, которые влияют на фрагментацию ДНК сперматозоидов:

• Ген повреждается посредством облучения рентгеновскими лучами или химиотерапией.
• Варикозное расширение вен, которое производилось в семенном канате.
• У мужчины наблюдалась высокая температура тела.
• Организм долгое время подвергался внешнему термическому воздействию.
• Наличие острого воспалительного процесса в течение долгого времени.
• Проявление оксидативного пост-тестикулярного стресса. Когда сперматозоиды движутся по эпидидимию, то может произойти фрагментация их ДНК. Эту причиной служит высвобождение сперматозоидами свободных радикалов, оказывающих негативное воздействие на формирование структуры ДНК. Также раздражение каспаз и эндонуклеаз может произойти под воздействием высокой температуры или воздействия токсичных веществ на организм мужчины.

Методы определения фрагментации ДНК

Для определения фрагментации ДНК сперматозоидов существует множество методов, каждый из которых отличается определенной степенью правдоподобности. Большой популярностью пользуется TUNEL-тест. Его рекомендуют использовать многие специалисты, которые на протяжении долгого времени работают в этой области.

Давайте более детально разберемся в вопросе, как же производится непосредственно фрагментация ДНК в спермограмме. В эякулят добавляется специальное вещество, а затем производится тщательное исследование спермы под микроскопом. Целью данного исследования является подсчет количества здоровых сперматозоидов, а также тех, которые имеют фрагментацию ДНК. Их внешний вид значительно разниться, поэтому специалист сможет безошибочно различить их по определенным параметрам.

Результат анализа выдается в виде фото, на котором находится изображение сперматозоидов. Также важный критерий – это процентное соотношение здоровых клеток к тем, которые имеют ярко выраженную фрагментацию ДНК. Заключение может выдать только квалифицированный в данной области специалист. При этом производится соотношение здоровых клеток, к тем, которые имеют структурные повреждения. Следует отдельно провести сравнение с показателями, которые соответствуют норме.

Преимущества использования TUNEL-теста

Главный плюс проведения исследования заключается в том, что производится тщательное изучение дефрагментации материала, производятся SCSA и SCD тесты, которые покажут возможные нарушения в формировании структуры ДНК и аномальные формы. Следует отметить, что прогноз таких анализов практически не производится. Тест выполняется для определения показателей, которые характерны мужчине сегодня. Прогнозирование можно производить только на основе выбранного курса лечения. Отметим, что этим тестом была отмечена норма патологий в эякуляте мужчины. Она составляет пятнадцать процентов.

TUNEL-тест предполагает исследование клеток при взаимодействии с энзимом. Это вещество при проникновении в сперматозоид производит его окрашивание в определенный цвет. На сегодняшний день чаще всего используется метод светлого поля или окрашивание оболочки ярким, мерцающим цветом. Последний метод получил название флюоресценции.

Показания к назначению фрагментации ДНК сперматозоидов

Для проведения подобного тестирования следует предварительно получить назначения своего лечащего врача. Он предписывается только в строго определенной ситуации.

Были выявлены основные показатели, которые служат основанием для назначения TUNEL-теста:

Исследование фрагментации ДНК – сложная и кропотливая процедура, которая производится для определения возможных причин отсутствия оплодотворения. Используется по назначению врача в соответствии с регламентом и правилами процедуры. Несет исключительно информативный характер.

При желании зачать ребенка многие пары сталкиваются с проблемами, причина которых порой кроется в неспособности к фертильности у мужчины. В таких случаях обращаются к врачам, которые в первую очередь отправляют на сдачу анализов. Выявленная в ходе исследований фрагментация ДНК спермограммы – одна из причин бесплодия мужчины.

Наш постоянный читатель избавился от проблем с потенцией действенным методом. Он проверил его на себе - результат 100% - полное избавление от проблем. Это натуральное средство на основе трав. Мы проверили метод и решили посоветовать его Вам. Результат быстрый.ДЕЙСТВЕННЫЙ МЕТОД .

Этот показатель начали изучать сравнительно недавно.

Разрыв цепочки ДНК делает невозможным зачатие, поскольку фрагментация ДНК мужских половых клеток – патологическое явление. Несмотря на то что их подвижность не нарушается, а количество в эякуляте соответствует норме, оплодотворение все равно не происходит, так как целостность генетического материала сперматозоидов нарушена.

На сегодняшний день это явление - большая проблема, так как, по статистическим данным, около 20% случаев беременности завершаются:

• выкидышем;
• отсутствием зародыша.

Нарушение цельности хромосом в сперматозоидах ведет к разделению ДНК, и даже если наступает оплодотворение, то тормозится дальнейшее развитие эмбриона.

Спермограмма позволяет оценить способность половых клеток мужчины к передаче качественного материала ребенку при слиянии с яйцеклеткой.

Причины появления нарушений

Выделяют внутренние патологии сперматогенеза (генетические дефекты или аномальное развитие) и внешние (повреждения яичек, гипертермия, гонадотоксины, гормональные отклонения, оксидативный стресс).

К нарушениям ведут:

• поздний возраст отцовства;
• варикоцеле;
• инфекционные заболевания мочеполовой системы;
• травмы;
• гонадотоксины (вещества, оказывающие отрицательное воздействие на формирование семенной жидкости).

Бесплодие у представителей сильного пола может развиться в результате нарушений работы следующих систем организма:

• эндокринной;
• половой;
• сердечно-сосудистой;
• иммунной;
• нервной.

Главная функция сперматозоида – доставка и передача здорового материала яйцеклетке. После оплодотворения образуется зигота без патологий, эмбрион развивается нормально, без отклонений. Если целостность «информации» нарушена, то возможны различные патологии.

Оказывать влияние на возраст сегодня медицина еще не может. Однако в плане стабилизации фертильности предлагаются:

• ликвидация варикоцеле;
• ведение здорового образа жизни;
• применение антиоксидантов;
• использование ВРТ.

1. Варикоцеле. Оксидативный стресс, при котором повреждаются клетки из-за окисления, при расширении вен семенного канатика приводит к структурным изменениям ДНК. Возможны разрывы цепей, повреждения нуклеотидных пар, хромосомные изменения, мутации. У мужчин, страдающих варикоцеле, индекс фрагментации повышен. При этом данные спермограммы могут быть в норме. Сравнительная статистика показала, что до операции по удалению варикоцеле значение уровня фрагментации превышало норму. Результаты тестов после операции демонстрируют снижение показателя до оптимального уровня.
2. Возраст. Обычные параметры семенной жидкости со временем изменяются. Это проявляется в сокращении объема эякулята и общей численности половых клеток, плохой их активности, ухудшении морфологии. Этиология изменений зависит от накопленных с возрастом заболеваний. Это могут быть хронические инфекции, гормональная или сосудистая недостаточность, лишний вес. Влияние перенесенных или приобретенных болезней на сперматозоиды доказано. Изменяется их качество, возрастает степень фрагментации ДНК и численность клеток с увеличенными ядерными вакуолями. Медицинские исследования доказали, что возраст оказывает свое воздействие на функцию репродукции.
3. Образ жизни. Важный пункт в плане оптимизации фертильности – устранение негативных факторов риска появления бесплодия. Среди них называют лишний вес, гиподинамию, вредные привычки, кофе, перегревание, Wi-Fi и др. В восьмидесяти случаях из ста отмечается улучшение результатов тестов на фертильность среди мужчин, изменивших образ жизни. Отказ от курения, употребления спиртных напитков, правильное питание, регулярная половая жизнь значительно улучшают показатели спермограммы. Профессиональные факторы стресса также нужно исключить. Стоит серьезно задуматься о смене места работы, если она связана с горячим производством, кулинарным цехом. Вредны для нормальной репродукции взаимодействия с тяжелыми металлами, полимерами. Недопустимы контакты с радиационным и электромагнитным излучениями. Необходимо отменить прием лекарств, влияющих на показатели семенной жидкости или вызывающих повреждения клеток. К ним относят антидепрессанты, некоторые группы антибиотиков
4. Антиоксиданты. Антиоксидантная терапия улучшает эффект варикоцелэктомии. Прогресс наблюдается уже через три месяца после операции. Практика доказывает несомненную пользу перорального приема препаратов и отсутствие побочных эффектов. Обычно результат этой терапии выражается в значительном улучшении дефрагментации.
5. Вспомогательные репродуктивные технологии.Цель таких технологий – преодолеть высокую степень повреждения спермиев. Если сперма пациента не восстанавливается до нормы, при которой возможно естественное зачатие, то паре предлагается ПИКСИ. Это вспомогательный метод репродукции, суть которого заключается в следующем: производят отбор жизнеспособного сперматозоида и помещают его непосредственно в яйцеклетку. Этот способ дает возможность выбора одной здоровой клетки, в отличие от ЭКО.

Перед процедурой оплодотворения выбранная клетка подвергается полной проверке и проходит обработку гиалуроновой кислотой. Эффективность взаимодействия спермия с кислотой указывает на высокий показатель его репродуктивности. Значит, оплодотворение будет осуществляться только здоровой клеткой без патологий генетического материала.

Существует еще один способ преодоления высокой степени генетического нарушения клетки – это извлечение сперматозоидов из тестикул хирургическим путем: клетки в эякуляте имеют больше структурных нарушений, чем в яичках.

Какие анализы на фрагментацию можно сдать

Наличие патологии в работе репродуктивной функции определяется по нескольким методикам. По итогам исследования врач делает выводы о том, что вызвало нарушения, и назначает необходимое лечение.

В ситуации, когда фактор, повлиявший на возникновение бесплодия, не установлен и обычные исследования не помогают, назначают тест на уровень дефрагментации. Поводом становятся:

• варикоцеле;
• возраст мужчины после 45 лет;
• неустановленная причина бесплодия;
• многократные выкидыши у партнерши;
• подготовка к ЭКО;
• проверка эякулята для его консервации и донорства.

Для того чтобы определить наличие у пациента такого явления, как фрагментация ДНК спермограммы, необходимо провести ряд анализов и обследований.

Данные о фрагментации невозможно получить только традиционным исследованием. Спермограмма выявляет следующие данные:

• объем эякулята;
• подвижность спермиев;
• их общее количество;
• численность неподвижных сперматозоидов;
• наличие здоровых клеток;
• наличие эритроцитов;
• концентрация лейкоцитов;
• физические показатели спермы: цвет, запах, консистенция.

Цель анализа фрагментации ДНК спермограммы – проверка целостности генетического материала.

1. TUNEL–тест – метод исследования сперматозоидов на фрагментацию ДНК.
   В данном случае изучают соотношения поврежденных и здоровых клеток под микроскопом. Определенные энзимы добавляются в биоматериал, реагент их окрашивает. В результате клетка с патологией выглядит четко подцвеченной, тогда как здоровая – распределяет реагент не только внутри, но и вокруг себя.
   По завершении исследования пациенту выдается снимок и подробное описание. Приложением к расшифровке анализа идет анкета-выписка с указанием количества поврежденных и здоровых сперматозоидов. На основании полученных цифр врач планирует дальнейшее лечение, прогнозирует результат терапии.
   Подготовка перед забором биоматериала для исследования предполагает половое воздержание не менее 3–4 дней, а также отказ от алкоголя. Не рекомендуется посещение бани, сауны. Исключается использование подогрева сидений в автомобиле. Прием лекарственных препаратов в подготовительный период возможен только по согласованию с лечащим врачом. Забор семенной жидкости производится в день проведения процедуры.
   Методика позволяет провести точное исследование, что гарантирует реалистичные выводы и прогнозы последующей терапии.
2. Тест SCSA (или HALO) – изучение хроматина сперматозоидов.
   Индекс фрагментации (ИФ) не определяется при микроскопическом изучении качества семенной жидкости. ИФ нужен для назначения соответствующего лечения бесплодия при нарушении целостности ДНК клеток. Индекс фрагментации ДНК дает информацию об эффективности различных методов терапии, при этом оценка в процентном соотношении дается только сперматозоидам:
   ИФ > 0–15%: беременность возможна естественным путем.
   ИФ > 15–25%: оплодотворение естественным путем возможно, но время ожидания возрастает.
   В случае если беременность не наступает, можно провести курс искусственного осеменения.
   Если патологии есть и в женском организме или пара в более зрелом возрасте, врач может дать показания к ЭКО.
   ИФ > 30%: Шансов оплодотворения естественным путем или посредством искусственного осеменения мало. Рекомендовано ЭКО.
   ИФ > 50%: Низкая вероятность наступления беременности при помощи ЭКО. Применение ИКСИ дает более высокие шансы на оплодотворение.
   ИФ > 60%: Шансы на наступление беременности очень низкие. Единственная возможность – ИКСИ или сперма донора.

Лечение фрагментации

Исследования в области медицины указывают на шансы улучшения дефрагментации. В процессе терапии рекомендуется исключить факторы, отрицательно влияющие на мужское бесплодие:

• алкоголь;
• курение;
• токсины и химические вещества;
• ожирение.

Проводится общая диагностика состояния здоровья пациента. По необходимости осуществляется лечение заболеваний, влияющих на репродукцию организма. Курсы витаминотерапии, гормонотерапии и антиоксидантов применяются как один из вариантов лечения.

Женская яйцеклетка тоже может улучшить состояние дезоксирибонуклеиновой молекулы. Она обладает способностью исправлять мелкие повреждения оплодотворившего ее сперматозоида. Однако это случается нечасто. Способность женской половой клетки исправлять ДНК-цепочку зависит от ее качества. Чем моложе женщина, тем выше эта способность. Выделяют и другие факторы:

1. Качество повреждения.
2. Степень поражения.
3. Состояние здоровья женщины.

Для определения эффективности проведенных лечебных мероприятий рекомендуется повторное тестирование.

Изучение фрагментации половых клеток мужчины очень важно при постановке диагноза бесплодия и для эффективного результата ВРТ.

Низкие показатели целостности ДНК снижают шансы на зачатие естественным путем. Уменьшается репродуктивный потенциал эякулята, используемого в репродуктивных технологиях. Повышается частота патологий развития плода и выкидышей, а также увеличиваются риски заболеваний у новорожденных.

Определение нарушения целостности генетической информации сперматозоидов – важный показатель для пар с нарушением репродуктивной функции.

У Вас серьезные проблемы с ПОТЕНЦИЕЙ?

У Вас проблемы с ЭРЕКЦИЕЙ? Уже много средств перепробовано и ничего не помогало?

Эти симптомы знакомы вам не понаслышке:

• вялая эрекция;
• отсутствие желания;
• сексуальная дисфункция.

Единственный путь операция? Подождите, и не действуйте радикальными методами. Потенцию повысить ВОЗМОЖНО! Перейдите по ссылке и узнайте, как специалисты рекомендуют лечить...

Если раньше у пары могла возникнуть проблема бесплодия, и решить её было достаточно проблематично, потому что не было возможности выявить причину невозможности зачатия, то в современной медицине существуют устройства, знание, методы, технологии способные избавить от бесплодия как мужчин, так и женщин.

Одной из таких причин невозможности зачатия является фрагментация сперматозоидов. Следует подробно рассмотреть, что это за явление, и каким образом оно может быть устранено.

Процесс фрагментации спермы – это повреждение и разрыв цепочки ДНК в основании спермия. Основными причинами разрушения цепочки ДНК является недостаток белковых образований в клетках сперматозоидов, что впоследствии разрушает строение цепочки.

Чем меньше становится транспортного белка, тем больше вероятность получения повреждения в структуре ДНК. Впоследствии спермии теряют свою способность к зачатию новой жизни. Неповрежденное состояние цепочки ДНК – это основание, по которому генетические коды передаются будущему ребенку.

Следует заметить, что мужчины с диагнозом бесплодие имеют около 30% поврежденных спермиев. Среди здоровых мужчин около 10% имеют диагноз фрагментация ДНК спермограммы.

Почему нарушается целостность ДНК?

Причины, по которым генетическая структура сперматозоидов будет разрушаться, можно разделить на внутренние и внешние. К внутренним можно отнести причины, не видные невооруженным глазом, и на которые повлиять достаточно сложно, а именно:

• нарушение выбора мужских клеток;
• недостаточное взросление спермиев.

Сперматозоиды созревают и развиваются в мужских семенниках, яичках. В процессе взросления спермии могут иметь различные отклонения в генетической структуре и развитии. Это считается нормальным. Однако такие повреждённые экземпляры не поступают в семенной канал и извергаются по причине наличия в организме мужчины защитной функции, не пропускающей болезненные частицы.

Проходя через защитную функцию фрагментированные спермии уничтожаются. Но если процесс обороны нарушен или перестал действовать по причине ослабления иммунитета, то в таком случае больные экземпляры начинают поступать в семенной канал и в яйцеклетку. Это никаким образом не способствует здоровому оплодотворению.

Во втором случае сперматозоид не прошел всю стадию своего роста. Каждая мужская клетка должна дозреть до того момента, как поступить на оплодотворение в женскую яйцеклетку.

К внешним причинам, по которым происходит фрагментация цепочки ДНК относятся основания безответственного отношения человека к собственному здоровью.

У многих мужчин сегодня обнаруживается склонность к различным нарушениям в структуре клеток. Впоследствии эти нарушения могут вызывать бесплодие и диагноз фрагментация ДНК сперматозоидов.

Почему может нарушаться целостность цепочки ДНК? Вот некоторые часто встречающиеся основания для этого:

1. Проблемы могут появляться при несоблюдении мужчиной здорового образа жизни, если человек подвержен стрессу, чрезмерному употреблению алкогольных напитков, курению, злоупотреблению жирной пищей.
2. В случае работы в тяжелых условиях производства, а именно: окружение токсическими веществами, наличие постоянных аллергенов и других, оказывающих негативное влияние на мужской организм.
3. Долгое воздержание человека от половых контактов.
4. Воспалительный и инфекционный процессы в половых органах и элементах мочеиспускательной системы.
5. Предрасположенности с рождения к болезням органов половой системы, а также различные генетические аномалии и болезни.

И как можно понять из данного списка, некоторые причины возникновения бесплодия могут быть устранены, и состояние сперматозоидов может быть скорректировано. Но в некоторых случаях это сделать достаточно проблематично, и врачи в таком случае ищут другие методы и воздействия для устранения нарушений цепочки ДНК.

Как пройти проверку ДНК?

Процедуру проверки на состояние неповрежденности цепочки ДНК может назначить только лечащий врач. Такой действие не является обязательным при проведении исследования перед планированием зачатия ребенка. Только при определенных основаниях лечащий врач может направить пациента для прохождения проверки ДНК.

Анализ фрагментации ДНК сперматозоидов проводится по следующим основаниям:

• • не выявлено факторов, влияющих на бесплодие у пациента;
  • имеются основания для проведения технологии искусственного оплодотворения;
  • в случае выкидышей у полового партнера мужчины на ранних стадиях;

• для проверки качества спермы для консервации и донорства;

Обычно для проверки сперматозоидов мужчины используют метод спермограммы. Однако целостность цепочки ДНК может проверить только специальная процедура, называемая методом опосредованной метки разрыва цепочки ДНК.

Работает тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов следующим образом:

• в сперму добавляют химические вещества, вызывающие реакцию, которую рассматривают под увеличением в микроскопе;
• происходит просчет процентного соотношения качественных и поврежденных генетических цепочек.

До того, как пройти проверку на наличие фрагментации сперматозоида, мужчине следует пройти определенную подготовку.

• Во-первых, врач рекомендует мужчине не вступать в сексуальные контакты от двух до четырех дней.
• Во-вторых, мужчине следует воздерживаться от приема алкогольных напитков и никотина в течение семи дней перед процедурой.

• В-третьих, проконсультироваться о приеме лекарственных препаратов и витаминных комплексов до проведения процедуры проверки ДНК.
• В-четвертых, мужчине следует отказаться от теплового воздействия на организм:, подогрева сидений, посещения бань, саун и другого теплового воздействия.

Эякулят для проведения анализа собирается в лабораторных условиях путем самоудовлетворения.
После чего через несколько дней мужчине выдается результат проведенного анализа. В процентном соотношении нормальное количество поврежденных ДНК должно составлять не более 15% от общего числа сперматозоидов.

Проводить тесты на количество здоровых и поврежденных сперматозоидов следует два, а то и три раза, так как данное тестирование не является точным. К тому же есть вероятность самовосстановления количества разрушенных клеток, что приведет к восстановлению репродуктивной функции мужчины.

Каким образом можно восстановить структуру спермы?

Структура цепочки ДНК сперматозоида имеет способность к восстановлению. В таком случае у мужчины появляется возможность зачать здорового младенца. Однако восстановительному процессу будут мешать также и молодость женской яйцеклетки, и факторы, относящиеся к здоровью мужчины.

ВАЖНО! Исходя из способностей клеток постоянно изменяться, могут отличаться и анализы спермы разных периодов давности.

Мужчина соблюдением здорового образа жизни и путём следования рекомендациям лечащего врача может изменить и улучшить структуру цепочки ДНК. Таким образом, фрагментированный сперматозоид может восстановить свою репродуктивную функцию.

Восстановительный процесс цепочки ДНК сперматозоида – это возможный процесс. Мужской организм в состоянии справиться и устранить все недостатки собственных клеток. Однако в некоторых случаях, с этим справляется и женская яйцеклетка.

При попадании сперматозоида с нарушенным ДНК яйцеклетка восстанавливает эякулят, что приводит к нормальному и здоровому зачатию. Очень важным в таком взаимном восстановлении является возраст женщины: чем моложе яйцеклетка, тем больше у нее возможностей для реанимирования мужского сперматозоида.

К рекомендациям врача может относиться восстановительную терапию с применением препаратов антиоксидантов и витаминных комплексов. Данные вещества оказывают восстанавливающее воздействие на генетическую цепочку спермы.

Но в случае, если на мужчину длительное время оказывалось сильное влияние химических веществ, из-за чего и произошло видоизменение генетического материла, то в таком случае витаминные комплексы будут малоэффективны. В таком случае врачами назначается более комплексное и сильнодействующее лечение.

Лечение фрагментации ДНК современными технологиями

Медицина, отвечающая за восстановление репродуктивной функции человека, сделала возможным восстановление цепочки ДНК сперматозоидов.

Когда происходит процесс лечения, в первую очередь нужно устранить следующих негативные факторы, влияющие на бесплодие:

• никотин;
• алкоголь;
• химическое и токсическое влияние на организм;
• избыточный вес.

Параллельно с этим врачи проводят полную диагностику организма мужчины и устраняют сопутствующие болезни, имеющиеся патологии половых органов, варикоцеле, инфекции мочеполовой системы. Лечение витаминами и антиоксидантами является дополнительной активацией жизненной силы в организме.

В репродуктивных медицинских центрах для семейных пар предлагается услуга, которая поможет зачать здорового младенца. Называется она ИКСИ. Заключается этот процесс в том, что искусственно у мужчины выбирается жизнеспособный сперматозоид, который вводится в яйцеклетку партнёрши. Такая процедура отличается от популярного ЭКО тем, что врачи отбирают лучшие сперматозоиды, а не случайные.

Проверка проводится путем погружения выбранных сперматозоидов в гиалуроновую кислоту. Если мужская половая клетка в порядке, то она спокойно связывается с кислотой, после чего сперматозоид можно погружать в яйцеклетку. Зачатие происходит только от клетки без генетических повреждений.

Если у мужчины имеется слишком много сперматозоидов с нарушенным ДНК, то в таком случае, врачи могут провести хирургическую операцию по выделению клеток прямо из яичек. Это связано с тем, что при семяизвержении поврежденных мужских клеток становится больше.

Из вышеописанного следует, что излечение от мужского бесплодия в некоторых случаях возможно. Если восстановительный процесс клеток сперматозоидов требует отказа от вредных привычек, то в таком случае у семейной пары высока вероятность зачать здорового и крепкого младенца. Современная медицина и при такой диагнозе может помочь зачать ребенка нуждающейся паре.

Врач сексопатолог-андролог 1 категории. Глава Херсонского отделения Украинской ассоциации планирования семьи.

1 ФГБУ «Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» МЗ РФ, Москва
2 ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва, Россия
3 ФГБУ «Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова» МЗ РФ; ГБОУ ВПО «РНИМУ им. Н.И. Пирогова» МЗ РФ

Для цитирования: Овчинников Р.И., Гамидов С.И., Попова А.Ю., Ижбаев С.Х., Ушакова И.В., Голубева О.Н. Причины репродуктивных потерь у мужчин – фрагментация ДНК сперматозоидов // РМЖ. 2015. №11. С. 634

Введение
В настоящее время около 15–20% всех наступивших беременностей заканчиваются неудачно – это либо неразвивающаяся беременность, либо невынашивание (выкидыш) . Также к данной категории можно отнести и внематочную беременность. Все эти состояния относятся к репродуктивным потерям беременности. Значительную долю среди них составляют неудачные попытки применения программ вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) – неразвивающиеся беременности после экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) и/или интрацитоплазматической инъекции сперматозоида (ИКСИ).

Принято считать, что в абсолютно здоровой супружеской паре может встречаться не более 3 случаев невынашивания беременности в сроках ранее 20 нед. беременности, и это не требует какого-либо лечения. Однако при превышении этого порога такое состояние называют привычным невынашиванием беременности (ПНБ) или привычным выкидышем. Существует мнение, что этот диагноз должен ставиться уже после 2 произошедших выкидышей, поскольку вероятность последующего невынашивания беременности после 2 и 3 выкидышей схожа . Частота ПНБ в популяции составляет 2% от числа беременностей. Риск повторного невынашивания после 2 выкидышей составляет 24%, после 3 – 30%, после 4 – 40% .

Основными причинами ПНБ на сегодняшний день являются: инфекции мочеполовой системы, нарушения гемостаза (предрасположенность к тромбофилиям, нарушения фолатного цикла и др.), антифосфолипидный синдром, совпадения в системе HLA (II класса), хромосомные анеуплоидии .

Новый взгляд на роль мужчины при ПНБ
В то же время остается невыясненной роль мужского фактора в ПНБ. До сих пор считалось, что у мужчин необходимо только лечение инфекционно-воспалительных заболеваний мочеполовой системы. Следовало добиться эрадикации возбудителей инфекций, в т. ч. передающихся половым путем (хламидии, микоплазмы, уреаплазмы, гарднереллы и т. д.). Однако в последнее время были выяснены новые обстоятельства.
Как известно, с возрастом у женщин снижаются овариальный резерв и целостность ооцитов. У мужчин существует способность поддерживать определенный уровень фертильности в течение всей жизни, однако эта функция ухудшается постепенно. Наблюдаются снижение уровня половых гормонов, ухудшение сексуальной функции, ухудшение показателей сперматогенеза и, как следствие, снижение фертильности. Кроме того, увеличиваются неблагоприятные исходы беременности, мутации сперматозоидов de novo (растут на 4% в год), чаще встречаются хромосомные анеуплоидии. Все это приводит к репродуктивным потерям беременности или врожденным дефектам и заболеваниям у потомства .

Влияние отцовского возраста на качество спермы
Возрастные изменения обычных параметров спермы проявляются в сокращении объема спермы, уменьшении общего количества сперматозоидов, ухудшении подвижности и морфологии сперматозоидов. При этом концентрация сперматозоидов достоверно не меняется. Многие изменения до настоящего времени остаются предметом дискуссии. Этиология изменений связана с накоплением с возрастом сопутствующих заболеваний, таких как: сосудистая недостаточность (диабет, артериальная гипертензия), хронические инфекции (простатит и др.), ожирение, гормональная недостаточность. Однако до конца этиология все еще четко не определена .
L. Vagnini et al. оценивали влияние возраста на качество спермы. Oказалось, что с возрастом уменьшается количество и ухудшается качество сперматозоидов, увеличивается количество сперматозоидов с большими ядерными вакуолями (более 50% объема ядра), значительно возрастает степень фрагментации ДНК сперматозоидов (TUNEL, p<0,05). Авторы делают вывод, что возраст не только матери, но и отца влияет на репродуктивные способности пары .

Значение фрагментации ДНК сперматозоидов
Фрагментация ДНК сперматозоидов – нарушение целостности их ДНК, связанное с упаковкой патологического хроматина или дефицита протамина, оказывающее негативное влияние на репродуктивные исходы при естественном зачатии или в программах ВРТ. У бесплодных мужчин процент сперматозоидов с нарушением целостности ДНК – более 30%, у здоровых фертильных мужчин – менее 15%. При фрагментации ДНК спермы более 30% вероятность наступления беременности крайне низка .

Каково же клиническое значение оценки состояния хроматина и повреждения ДНК сперматозоидов? В исследовании канадских авторов в 2014 г. продемонстрировано, что такие изменения приводят к уменьшению мужского фертильного потенциала, низкой частоте наступления беременности, а также репродуктивным потерям. Результатами этого являются не только снижение эффективности программ ВРТ, но и невынашивание или неразвивающиеся беременности. Также увеличивается вероятность возникновения хромосомных нарушений у детей, врожденных дефектов, и наблюдается уменьшение срока жизни потомства .
Сравнительный анализ 3 методов оценки повреждения ДНК сперматозоидов представлен в исследовании L. Simon et al. (США, 2014). 238 мужчин обследовались в центре репродукции при помощи методов COMET, TUNEL и флоуцитометрической оценки хроматина. Методы TUNEL и COMET оказались более точными предикторами успешности ВРТ, чем флоуцитометрическая оценка хроматина. При этом было показано, что подготовленная сперма вместо нативной в программах ВРТ может отличаться ятрогенным увеличением повреждения ДНК сперматозоидов. Кроме того, женские факторы могут снизить прогностическое значение анализа ДНК спермы .
Группой иранских ученых исследовалось влияние фрагментации ДНК сперматозоидов на ПНБ. В 1-ю группу были включены 30 пар с ПНБ, во 2-ю (контроль) – 30 фертильных пар. В 1-й группе уровень фрагментации ДНК сперматозоидов составил 43,3%, что достоверно превышало таковой в группе контроля, – 16,7% (p=0,024). Сперма мужчин в парах с ПНБ имела более высокий уровень фрагментации ДНК, чем в контрольной группе, что указывает на возможную связь между идиопатическими репродуктивными потерями и фрагментацией ДНК сперматозоидов .

В недавно опубликованном метаанализе, в основу которого были положены результаты 16 когортных и 14 проспективных исследований (n=2969), было выявлено, что фрагментация ДНК сперматозоидов увеличивает риск невынашивания беременности после ИКСИ. Оценка фрагментации ДНК сперматозоидов проводилась методами TUNEL и COMET. Риск возникновения неразвивающейся беременности после ВРТ/ИКСИ у больных с высокой степенью фрагментации ДНК сперматозоидов составил 2,16 (1,54–3,03) (р<0,00001) .

В обзоре J.J. Tarin et al. рассматривались результаты использования программ ВРТ. Авторы проанализировали, почему процент рождения детей столь низок. Оказалось, что на данный показатель влияет множество факторов: прежде всего возраст родителей, хромосомные аномалии эмбриона, экологические факторы риска. Непосредственно сами ВРТ-процедуры: стимуляция яичников, криоконсервация гамет/эмбрионов, ооцитов, ИКСИ, биопсии эмбриона могут вызвать эпигенетические изменения в половых клетках и/или преимплантационных эмбрионах. Влияние оказывают митохондриальные, генетические и эпигенетические свойства гамет и эмбрионов. Исследователи пришли к выводу, что индуцированные и/или унаследованные нарушения ДНК в потомстве вряд ли можно предотвратить, даже заменив всю цитоплазму яйцеклеток в программах ВРТ .
С распространением ВРТ растет осознание важности повреждения ДНК спермы. На сегодня эти последствия еще в значительной степени неизвестны.

Бесплодные мужчины имеют значительно больше ДНК-повреждений спермы, чем фертильные мужчины, и это повреждение ДНК может негативно повлиять на репродуктивные исходы. Дефицит протаминов и воздействие активных форм кислорода могут быть причинами повреждения ДНК спермы. Повреждение ДНК сперматозоидов является вредным для исходов ВРТ. Тесты для оценки повреждения ДНК могут обеспечить лучшую прогностическую информацию, чем стандартные параметры спермы .
Важность оценки фрагментации ДНК сперматозоидов подтверждает следующий факт. В промышленном рыбоводстве для видов рыб, имеющих сперму с протаминами, используются тесты, сравнимые с FISH и COMET, для оценки повреждения ДНК сперматозоидов. Высокий уровень фрагментации ДНК может помешать эффективному искусственному воспроизводству. Указывается, что хотя сперматозоиды с поврежденной ДНК существенно не влияют на оплодотворение ооцитов, они могут оказать влияние на развитие эмбрионов и репродуктивный успех в рыбоводстве в целом .

Этиология повреждения ДНК сперматозоидов
Этиология нарушений хроматина и повреждения ДНК сперматозоидов очень разнообразна. В первую очередь это первичные или внутренние дефекты сперматогенеза (аномалии развития или генетические дефекты), вторичные или внешние повреждения тестикул (гонадотоксины, гипертермия, оксидативный стресс, эндокринные заболевания). Патогенез повреждений ДНК связан с дефицитом протаминов, наличием активных форм кислорода, нарушениями апоптоза, нарушениями замены гистонов на протамины в сперматидах, плохой упаковкой хроматина, усилением чувствительности к оксидативному стрессу дефектных сперматозоидов .
В практическом плане к повреждению ДНК сперматозоидов приводят поздний отцовский возраст, варикоцеле, инфекции мочеполовых путей, травмы спинного мозга, лихорадки, гонадотоксины .
Поскольку повлиять на возраст в настоящее время медицина не может, в стратегии по оптимизации фертильности предлагаются: устранение варикоцеле, здоровый образ жизни, использование антиоксидантов, применение новых достижений ВРТ, сокращение количества внеклеточной ДНК .

Влияние варикоцелэктомии на фрагментацию ДНК сперматозоидов
Что дает устранение варикоцеле? По данным метаанализа на основе рандомизированных проспективных исследований (Embase, Medline), после варикоцелэктомии отмечались: увеличение концентрации сперматозоидов на 12,3 млн/мл, подвижности – на 10,86% (p<0,001), а также уменьшение оксидативного стресса, фрагментации ДНК и улучшение ультраструктурной морфологии сперматозоидов. Частота наступления спонтанной беременности была выше, чем в группе наблюдения (отношение шансов (ОШ) 2,23, 95% доверительный интервал (ДИ) 0,86–5,78) .

В другом метаанализе рандомизированных проспективных исследований оценивались: концентрация, подвижность, морфология, оксидативный стресс, фрагментация ДНК сперматозоидов и частота наступления беременности. Отмечено статистически значимое улучшение показателей у пациентов после варикоцелэктомии по сравнению с группой наблюдения (ОШ 2,69, 95% ДИ 1,16–6,24). Частота наступления спонтанной беременности составила 30%, наблюдалось уменьшение количества случаев невынашивания беременности в I триместре. По мнению авторов, главной альтернативой варикоцелэктомии является использование программ ВРТ .
В исследовании M. Smit et al. отмечено уменьшение фрагментации ДНК сперматозоидов после варикоцел­эктомии. У 49 бесплодных мужчин с варикоцеле оценивались: спермограмма, индекс фрагментации ДНК и частота наступления беременности до и через 2 года после операции по поводу варикоцеле. В результате хирургического лечения варикоцеле концентрация сперматозоидов возросла с 4,8 до 14,3 млн/мл, подвижность – с 16,7 до 26,6% (у 63% больных – более чем на 50%). Индекс фрагментации ДНК сперматозоидов сократился с 35,2 до 30,2% (р=0,019). Спонтанная беременность наступила у супруг 37% больных, беременность после ВРТ – у 24% .
Также изменения качества ДНК спермы после микрохирургической варикоцелэктомии отмечены в исследовании американских авторов. 74 мужчины перенесли микрохирургическую варикоцелэктомию (27 – одностороннюю и 47 – двухстороннюю). Фрагментация ДНК (TUNEL) снизилась с 13,72 до 7,54% (р<0,001). Авторы сделали вывод, что микрохирургическая варикоцелэктомия приводит к снижению высокого уровня фрагментации ДНК сперматозоидов как одного из патогенетических путей возникновения мужского бесплодия .

Интересные данные о влиянии варикоцеле на спонтанные выкидыши в I триместре привели M. Ghanaie et al. В исследование были включены 136 мужчин с варикоцеле и нормальными параметрами спермограммы, жены которых имели ПНБ. Больным 1-й группы была выполнена варикоцелэктомия (n=68), 2-я группа была контрольной (n=68). В результате частота ПНБ в 1-й группе составила 13,3%, а во 2-й группе – 69,2% (р=0,01). Таким образом, устранение варикоцеле приводило к достоверному снижению количества случаев ПНБ. Концентрация сперматозоидов, время, прошедшее после операции, и возраст супруги – наиболее важные прогностические факторы успешного течения беременности .

Устранение неблагоприятных факторов риска нарушений фертильности
Следующим пунктом стратегии оптимизации фертильности является устранение неблагоприятных факторов риска развития бесплодия. К ним относятся ожирение, гиподинамия, курение, алкоголь, перегревание, баня (сауна), мобильные телефоны, Wi-Fi, ноутбуки и др. .

В исследовании N. Zampieri et al. рассматривалось влияние коррекции неблагоприятных факторов образа жизни на качество эякулята у больных с бесплодием. Оценивалась спермограмма 52 курящих и употребляющих спиртное и кофе пациентов с бесплодием. У 76% мужчин, которые бросили курить или уменьшили количество сигарет, исключили кофе и спиртные напитки, включили в ежедневный рацион фрукты и овощи, наладили регулярную половую жизнь, отмечено улучшение показателей спермограммы .

Приведенные британскими учеными в метаанализе по влиянию мобильных телефонов на качество сперматозоидов данные о 1492 образцах спермы из 10 исследований свидетельствуют о том, что у пользователей наблюдалось снижение подвижности сперматозоидов на 8,1%, их жизнеспособности – на 9,1% (р<0,05). При этом концентрация сперматозоидов достоверно не менялась. Авторы указывают на необходимость дальнейших исследований в этой области и в области повреждения ДНК сперматозоидов .
Необходимо исключение профессиональных вредностей (работа на горячем производстве, в кулинарном цехе, контакт с тяжелыми металлами, пестицидами, полимерами, пылью, воздействие радиационного и электромагнитного излучения и др.) .

Отмена лекарственных препаратов, потенциально ухудшающих показатели спермограммы (циметидин, блокаторы Са2+, спиронолактон, статины, некоторые антибиотики (нитрофурантоины, эритромицин, сульфаниламиды), трициклические антидепрессанты, ингибиторы обратного захвата серотонина, литий, химиотерапевтические препараты, ингибиторы 5α-редуктазы, α–блокаторы и др.), также может привести к улучшению фертильности за счет снижения повреждения ДНК сперматозоидов .

Антиоксидантная терапия
Эффект применения пероральных антиоксидантов и микроэлементов (супероксиддисмутаза, каталаза, глутатионпероксидаза, витамины Е, С, каротиноиды, убихинон, селен, цинк, фолиевая кислота, ацетилцистеин, L-карнитин, коэнзим Q10) оценивался в базе данных (Cochrane) мужчин из 2876 пар, проходящих программы ВРТ. Исследования показали, что употребление в пищу антиоксидантов и микроэлементов способствует повышению шансов на зачатие для субфертильных пар, прибегающих к использованию ВРТ. Дальнейший сравнительный анализ необходим для определения наиболее значимых микроэлементов .
Измерение способности сперматозоидов связываться с гиалуроновой кислотой применяется для прогнозирования возможности оплодотворения яйцеклетки во время ЭКО. А. Yagci et al. показали, что гиалуроновая кислота обладает высокой селективностью связывания сперматозоидов с высокой целостностью ДНК . В. Breznik et al. указали, что использование тест-пластин HBA является полезным для прогнозирования способности сперматозоидов к оплодотворению яйцеклеток в условиях ЭКО и отбора образцов спермы, подходящих для ЭКО и ИКСИ .

Данные исследования показали, что HBA-тест может использоваться для оценки целостности ДНК сперматозоидов. Повышение способности связывания с гиалуроновой кислотой означает увеличение числа более подвижных и морфологически нормальных сперматозоидов с высоким уровнем целостности ДНК, что является признаком высокой вероятности эффективного оплодотворения и последующей нормальной беременности.
В современных публикациях широко обсуждается влияние микронутриентов на качество спермы. Целью работы австрийских авторов являлась оценка влияния препарата, содержащего 8 микронутриентов, на результаты теста связывания сперматозоидов с гиалуроновой кислотой в нативном эякуляте (HBA-тест) у мужчин с идиопатическим бесплодием в рамках открытого пилотного сравнительного исследования. В основную группу были включены 67 мужчин с идиопатическим бесплодием. В ходе исследования им было предложено в течение 3 мес. ежедневно принимать по 2 капсулы нутрицевтика, каждая капсула которого содержит L-карнитин, L-аргинин, цинк, витамин Е, глутатион, селен, коэнзим Q10 и фолиевую кислоту (PROfertil®). До и после исследования проводился анализ спермы. В группу контроля вошли 40 мужчин с бесплодием, не получавшие никакой терапии. У них также определялись изменения показателей HBA-теста по сравнению с исходными данными. Было установлено, что результаты HBA-теста значительно улучшились в основной группе после 3 мес. лечения. Медиана показателей анализа изменилась с 56% в исходной точке до 74% в конце исследования (р<0,05). Полученная разница в основной группе была достоверно выше – на 19,7% по сравнению с исходным значением, при этом в контрольной группе показатели ухудшились на 2,1%. Доля пациентов с улучшением показателей HBA-теста через 3 мес. после исходного анализа была значительно выше в основной группе, чем в контрольной (74,6 и 30% соответственно, р=0,0001). Это свидетельствует о том, что у мужчин с бесплодием, получавших препарат, состоящий из микронутриентов, повысилась способность связывания сперматозоидов с гиалуроновой кислотой .

Применение данного подхода представляется важным для лечения бесплодия, т. к. низкие показатели целостности ДНК связаны со снижением вероятности естественного зачатия, уменьшением оплодотворяющего потенциала спермы, используемой в программах ВРТ, повышением частоты нарушений эмбрионального развития и выкидышей, а также увеличением вероятности заболеваний у новорожденных .
Вместе с тем роль антиоксидантов в улучшении качества спермы остается спорной – преимущественно по причине низкого качества большинства исследований и использования различных комбинаций антиоксидантов, их дозировок, а также различной длительности терапии. Частота наступления беременности, являющаяся наиболее значимым результатом, оценивалась только в некоторых исследованиях .
В рандомизированном исследовании иранских ученых оценивалось добавление антиоксидантной терапии к стандартной варикоцелэктомии в послеоперационном периоде. 1-ю группу составили 50 мужчин, перенесших ингвинальную варикоцелэктомию; 2-ю группу – 50 мужчин после ингвинальной варикоцелэктомии и приема L–карнитина 250 мг 3 р./сут в течение 6 мес. Повреждение ДНК сперматозоидов сократилось к 3 мес. в 1-й группе до 10,4%, а во 2-й группе – до 5,6%. Однако к 6 мес. составило 9,8 и 7,8% соответственно. Авторы делают вывод, что добавление антиоксидантной терапии после варикоцелэктомии улучшает эффект через 3 мес. после операции .

Новые достижения ВРТ
Недавно опубликован метаанализ, в котором оценивалась эффективность интрацитоплазматической инъекции морфологически избранного сперматозоида под большим увеличением (ИМСИ) на исходы ВРТ при фрагментации ДНК сперматозоидов (Великобритания, 2014). В анализ были включены 54 пары (ИКСИ – 20, ИМСИ – 34). Индекс фрагментации ДНК составлял более 30% (TUNEL). Не было статистических различий в частоте наступления беременности (ИКСИ – 55,6%, ИМСИ – 52,9%), частоте рождения живых детей (50%) или выкидышей (ИКСИ – 5,6%, ИМСИ – 8,8%). Авторами сделан вывод о том, что ИМСИ не может улучшить исходы ВРТ при высоком уровне фрагментации ДНК сперматозоидов .

Однако метаанализ оценки состояния здоровья 1028 детей, рожденных после проведения ЭКО с 2005 по 2010 г., показал, что при применении ИМСИ наблюдалась более низкая частота основных пороков развития (1,33%), чем при стандартной ИКСИ (3,8%). Были собраны медицинские данные и катамнез в течение 2 лет после рождения. Эти 2 группы были сопоставимы по возрасту родителей, проведенному лечению, количеству ооцитов, дней переноса эмбрионов, гестационному возрасту и весу при рождении. Тем не менее частота основных пороков была значительно ниже с ИМСИ (6/450, 1,33%) по сравнению с ИКСИ (22/578, 3,80%; ОШ 0,35, 95% ДИ 0,14–0,87, р=0,014). В заключение подчеркивается благотворное влияние ИМСИ на результаты ВРТ . Однако требуются дальнейшие исследования в данной области.

Внеклеточная ДНК и протеомика спермы
Хорошо известны ограничения традиционных методов анализа спермы в диагностике и лечении мужского бесплодия. Для его оценки используется все большее число сложных анализов, включая измерения фрагментации ДНК сперматозоидов, окислительного стресса и антиоксидантной способности. В последние несколько лет отмечаются огромные достижения в области протеомики спермы, определения количества внеклеточной ДНК, что обещает революцию в диагностике и лечении бесплодия и ПНБ .

Заключение
Оценка фрагментации ДНК сперматозоидов является важным прогностическим показателем. Показаниями к оценке фрагментации ДНК сперматозоидов являются: бесплодие неясного генеза при нормальных показателях спермограммы, ПНБ (неразвивающиеся беременности) у супруги, неудачные попытки использования ВРТ в анамнезе, поздний отцовский возраст.
Для устранения проблемы ПНБ в паре мужчине необходимо провести лечение инфекций мочеполовой системы, устранить варикоцеле, вести здоровый образ жизни, применять антиоксидантную терапию. Микрохирургическая варикоцелэктомия по собственной модифицированной методике повышает частоту спонтанной беременности и улучшает результаты ВРТ (в т. ч. при неудачных попытках в анамнезе). Варикоцелэктомия уменьшает оксидативный стресс и фрагментацию ДНК сперматозоидов, способствует сокращению репродуктивных потерь (особенно в I триместре беременности).

Арсенал андролога неуклонно расширяется. Все виды этой современной медицинской помощи парам с ПНБ оказываются в полном объеме в условиях отделения андрологии и урологии, сохранения и восстановления репродуктивной функции, отделения профилактики и терапии невынашивания беременности, а также в научных лабораториях ФГБУ «Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова» Минздрава России.

Литература
1. Сидельникова В.М., Сухих Г.Т. Невынашивание беременности: Руководство для практикующих врачей. 2010, МИА. 986 с.
2. Сидельникова В.М. Привычная потеря беременности. М.: Триада - Х, 2002. 304 с.
3. Тетруашвили Н.К. Ранние потери беременности (иммунологические аспекты, пути профилактики и терапии): Автореф. дис. ... докт. мед. наук. М., 2010.
4. Тихомиров А.Л., Лубнин Д.М. Привычное невынашивание беременности: причины, диагностика и современные подходы к терапии // Фарматека. 2004. № 1 (80). С. 5–6.
5. Агаджанова А.А. Современные подходы к диагностике и лечению антифосфолипидного синдрома в клинике невынашивания беременности // Вестн. Рос. ассоц. акуш.-гин. 1999. № 2. С. 40–45.
6. Belloc S., Hazout A., Zini A. et al. How to overcome male infertility after 40: Influence of paternal age on fertility // Maturitas. 2014 May. Vol. 78 (1). Р. 22–29.
7. Vagnini L., Baruffi R.L., Mauri A.L. et al. The effects of male age on sperm DNA damage in an infertile population // Reprod Biomed Online. 2007 Nov. Vol. 15 (5). Р. 514–519.
8. Spanò M., Bonde J.P., Hjøllund H.I. et al. Sperm chromatin damage impairs human fertility. The Danish First Pregnancy Planner Study Team // Fertil Steril. 2000 Jan. Vol. 73 (1). Р. 43–50.
9. Zini A., Albert O., Robaire B. Assessing sperm chromatin and DNA damage: clinical importance and development of standards // Andrology. 2014 May. Vol. 2 (3). Р. 322–325.
10. Fernández-Gonzalez R., Moreira P.N., Pérez-Crespo M. et al. Long-term effects of mouse intracytoplasmic sperm injection with DNA-fragmented sperm on health and behavior of adult offspring // Biol Reprod. 2008 Apr. Vol. 78 (4). Р. 761–772.
11. Simon L., Liu L., Murphy K. et al. Comparative analysis of three sperm DNA damage assays and sperm nuclear protein content in couples undergoing assisted reproduction treatment // Hum Reprod. 2014 May. Vol. 29 (5). Р. 904–917.
12. Khadem N., Poorhoseyni A., Jalali M. et al. Sperm DNA fragmentation in couples with unexplained recurrent spontaneous abortions // Andrology. 2014 Mar. Vol. 46 (2). Р. 126–130.
13. Robinson L., Gallos I.D., Conner S.J. et al. The effect of sperm DNA fragmentation on miscarriage rates: a systematic review and meta-analysis // Hum Reprod. 2012. Vol. 27 (10). Р. 2908–2917.
14. Tarín J.J., García-Pérez M.A., Cano A. Assisted reproductive technology results: why are live-birth percentages so low? // Mol Reprod Dev. 2014 Jul. Vol. 81 (7). Р. 568–583.
15. Zini A., Libman J. Sperm DNA damage: importance in the era of assisted reproduction // Curr Opin Urol. 2006 Nov. Vol. 16 (6). Р. 428–434.
16. Gosálvez J., López-Fernández C., Hermoso A. et al. Sperm DNA fragmentation in zebrafish (Danio rerio) and its impact on fertility and embryo viability - Implications for fisheries and aquaculture // Aquaculture. 2014. Vol. 433. Р. 173–182.
17. Moskovtsev S.I., Mullen J.B., Lecker I. et al. Frequency and severity of sperm DNA damage in patients with confirmed cases of male infertility of different aetiologies // Reprod Biomed Online. 2010. Vol. 20. Р. 759–763.
18. Baazeem A., Belzile E., Ciampi A. et al. Varicocele and male factor infertility treatment: a new meta-analysis and review of the role of varicocele repair // Eur Urol. 2011. Vol. 60. Р. 796–808.
19. Ficarra V., Crestani A., Novara G. Varicocele repair for infertility: what is the evidence? // Curr Opin Urol. 2012. Vol. 22 (6). Р. 489–494.
20. Smit M., Romijn J.C., Wildhagen M.F. et al. Decreased sperm DNA fragmentation after surgical varicocelectomy is associated with increased pregnancy rate // J Urol. 2013 Jan. Vol. 189 (1 Suppl). Р. 146–150.
21. Dabaja A., Wosnitzer M., Goldstein M. Varicocele and hypogonadism // Curr Urol Rep. 2013 Aug. Vol. 14 (4). Р. 309–314.
22. Mansour Ghanaie M., Asgari S.A., Dadrass N. et al. Effects of varicocele repair on spontaneous first trimester miscarriage: a randomized clinical trial // Urol J. 2012. Vol. 9 (2). Р. 505–513.
23. Zini A., Sigman M. Are tests of sperm DNA damage clinically useful? // Pros and cons. J Androl. 2009. Vol. 30. Р. 219–229.
24. Zampieri N., Zamboni C., Ottolenghi A. The role of lifestyle changing to improve the semen quality in patients with varicocele // Minerva Urol Nefrol. 2008 Dec. Vol. 60 (4). Р. 199–204.
25. Adams J.A., Galloway T.S., Mondal D. et al. Effect of mobile telephones on sperm quality: a systematic review and meta-analysis // Environment Int. 2014. Vol. 70. Р. 106–112.
26. Cavallini G. Male idiopathic oligoasthenoteratozoospermia // Asian J Androl. 2006 Mar. Vol. 8 (2). Р. 143–157.
27. Stearns G., Turek P.J. Avoiding toxins including spermatotoxic medications // Semin Reprod Med. 2013. Vol. 31 (4). Р. 286–292.
28. Showell M.G., Mackenzie-Proctor R., Brown J. et al. Antioxidants for male subfertility // Cochrane Database Syst Rev. 2014. Vol. 12. CD007411.
29. Yagci A. et al. Spermatozoa bound to solid state hyaluronic acid show chromatin structure with high DNA chain intergrity: an acridine orange fluorescence study // J Androl. 2010. Vol. 31 (6). Р. 566–572.
30. Breznik B. et al. Are sperm DNA fragmentation, hyperactivation, and hyaluronan-binding ability predictive for fertilization and embryo development in in vitro fertilization and intracytoplasmic sperm injection? // Fertil Steril. 2013. Vol. 99 (5). Р. 1233–1241.
31. Lipovac M., Bodner F., Schütz А. et al. Increased hyaluronan acid binding ability of spermatozoa indicating a better maturity, morphology, and higher DNA integrity after micronutrient supplementation // European Medical Journal Urology. 2014. Vol. 1. Р. 60–65.
32. Aitken R.J., De Iuliis G.N. On the possible origins of DNA damage in human spermatozoa // Mol Hum Reprod. 2010. Vol. 16. Р. 3–13.
33. Agarwal A., Nallella K.P., Allamaneni S.S. et al. Role of antioxidants in treatment of male infertility: an overview of the literature // Reprod Biomed Online. 2004. Vol. 8. Р. 616–627.
34. Pourmand G., Movahedin M., Dehghani S. et al. Does L-carnitine therapy add any extra benefit to standard inguinal varicocelectomy in terms of deoxyribonucleic acid damage or sperm quality factor indices: a randomized study // Urology. 2014 Oct. Vol. 84 (4). Р. 821–825.
35. De Vos A., Polyzos N.P., Verheyen G., Tournaye H. Intracytoplasmic morphologically selected sperm injection (IMSI): a critical and evidence-based review // Basic Clin Androl. 2013 Nov. Vol. 8. № 23. Р. 10.
36. Cassuto N.G., Hazout A., Bouret D. et al. Low birth defects by deselecting abnormal spermatozoa before ICSI // Reprod Biomed Online. 2014 Jan. Vol. 28 (1). Р. 47–53.
37. Barazani Y., Agarwal A., Sabanegh E.S. Jr. Functional sperm testing and the role of proteomics in the evaluation of male infertility // J Urol. 2014. Vol. 84. Р. 255–261.

Описание

Метод определения

Флуоресцентная микроскопия.

Исследуемый материал Эякулят

Выявление фрагментации ДНК в сперматозоидах (TUNEL).

Анализ повреждений ДНК сперматозоидов для оценки фертильной функции и выявления причин бесплодия и спонтанных абортов. В места разрыва ДНК с помощью энзиматической реакции встраивается флуоресцирующий меченый нуклеотид. Под микроскопом подсчитывается доля флуоресцирующих сперматозоидов.

Для исследования необходимо выполнить параллельно с TUNEL светооптическое исследование эякулята (), исследование выполняется из одного и того же образца биоматериала. Если светооптическое исследование было выполнено ранее (1-3 месяца назад), для выполнения TUNEL необходимо предоставить его результаты.

Приём биоматериала на исследование осуществляется в пн. вт., ср., чт., пт. с 7.30 до 15.00 в медицинском офисе, расположенном по адресу: .

Подготовка

Перед сбором материала необходимо не менее, чем 48-часовое, и не более, чем 7-дневное, воздержание. Причём, при проведении повторных исследований желательно устанавливать один и тот же период воздержания. В течение этого промежутка времени необходимо исключить приём алкогольных напитков, лекарственных препаратов (если это не угрожает жизни и здоровью клиента), воздействие повышенной температуры (посещение бани/сауны, производственная гипертермия, лихорадочные состояния), ультразвукового излучения. Также в этот период необходимо полноценное питание. В день, предшествующий выполнению анализа, желательно исключить тяжелые физические и психологические нагрузки. Для исследования необходимо выполнить параллельно с TUNEL светооптическое исследование эякулята (), исследование выполняется из одного и того же образца биоматериала. Если светооптическое исследование было выполнено ранее (1-3 месяца назад), для выполнения TUNEL необходимо предоставить его результаты. Перед сдачей материала следует помочиться. Эякулят собирается путём мастурбации в специальную стерильную посуду. Для получения корректных результатов исследования необходимо собрать весь полученный эякулят. В том случае, если одновременно с TUNEL заказаны и другие исследования эякулята - все исследования выполняются из одного и того же образца биоматериала. Направительный бланк:

Показания к назначению

1. «Идиопатическое» бесплодие (результаты светооптического исследования эякулята не выходят за рамки нормы, не выявлены другие причины).
2. Наличие спонтанных абортов в анамнезе пары.
3. Подготовка к применению методов репродуктивных технологий: инсеминации, ИКСИ (интрацитоплазматического введения сперматозоидов), ЭКО (экстракорпорального оплодотворения).

Интерпретация результатов

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Референсные значения: содержание сперматозоидов с разрывами ДНК - не более 15%. Причины появления патологических изменений:

1. врождённые (генетически обусловленные) нарушения спермиогенеза (дефицит протаминов);
2. воздействие вредных факторов (различные виды излучения, приём некоторых лекарственных средств, систематический приём алкоголя, отравление свинцом, ртутью);
3. хронические воспалительные заболевания репродуктивных органов (простатит, везикулит);
4. варикоцеле.